
ELISA 的動態(tài)范圍是指試劑盒能夠準確測定的抗原濃度范圍。
閱讀下文,詳細了解如何確定動態(tài)范圍以及如何解讀不同樣本類型下的動態(tài)范圍。
如何計算動態(tài)范圍?
動態(tài)范圍可以通過繪制抗原濃度與檢測信號之間關系的標準曲線來確定。
準確且符合動態(tài)范圍的檢測必須滿足以下條件:
●標準品平行試樣之間的標準偏差較低
●抗原濃度與檢測信號之間的相關性較強
我們的 ELISA 試劑盒說明書和實驗方案通常會詳細說明實驗樣本的動態(tài)檢測范圍,該動態(tài)范圍已經(jīng)通過檢測進行準確測定。 這些動態(tài)范圍通常有兩種表示方式:被測蛋白的濃度或稀釋度(后者更常見于血漿或血清等樣本)。
當動態(tài)范圍以濃度表示時,該如何解釋?
Abcam 的人 Frataxin ELISA 試劑盒 (ab176112) 的實驗方案包含一份表格,其中列出了預計位于動態(tài)范圍內(nèi)的各種細胞系裂解物的總蛋白濃度范圍。 測試時,這些濃度都在標準曲線的線性范圍內(nèi)。
對于 HeLa 細胞裂解液:
●在動態(tài)范圍的下限,ELISA 可以準確檢測的總共濟蛋白濃度為 0.5 µg/mL
●在動態(tài)范圍的上限,ELISA 可以準確檢測的總共濟蛋白濃度為 100 µg/mL
●因此,動態(tài)范圍表示為 0.5 – 100 µg/mL
當動態(tài)范圍以稀釋度或百分比表示時,該如何確定檢測范圍?
其他樣本類型(如血清和血漿)的濃度動態(tài)范圍通常以稀釋度(分數(shù)或百分比)表示。
以 Abcam 腫瘤壞死因子 (TNF) α ELISA 試劑盒為例 (ab208348)。 該試劑盒實驗方案中包含一份檢測范圍內(nèi)血漿樣本的稀釋倍數(shù)推薦表。
對于肝素血漿:
在動態(tài)范圍的下限,ELISA 試劑盒可以準確檢測稀釋度為 1/16(6.25/100,或 6.25%)的蛋白質(zhì)。
在動態(tài)范圍的上限,ELISA 試劑盒可以準確檢測未稀釋血漿中的蛋白質(zhì)(100/100 =1,或 100%)
因此,動態(tài)范圍表示為 6.25 – 100%
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